ADA2018点评 | 张梅教授：T1DM患者外周血调节性B细胞数量及功能的初步探究
编者按
在第78届美国糖尿病协会（ADA）科学年会上，南京医科大学第一附属医院张梅教授团队呈现了两项最新研究成果。本期微信为大家介绍在“1型糖尿病免疫学新视野”专题展示的一项口头报告（97-OR），并邀请张梅教授予以精彩点评。
研究摘要
王悦舒 王星 秦瑶 张梅*
目的：探讨CD24hi CD38hi B细胞在1型糖尿病（T1DM）发病机制中的作用。
方法：选取62例T1DM患者为研究对象，同时招募74例年龄、性别相匹配的志愿者作为对照组。记录受试者临床指标包括：年龄、性别、病程和糖化血红蛋白（HbA1c）水平。采用流式细胞术分析T1DM患者外周血调节性B细胞（B10）和其他各淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+IFN-γ+、CD4+ TNF-α+、CD4+ IL-4+、CD4+ IL-17+和CD4+ CD25+Foxp3+ T细胞）的比例，Pearson相关系数进行相关性分析。采用混合淋巴细胞共培养探究B10细胞功能。
结果：人外周血B10细胞表型为CD24hi CD38hi。健康人外周血CD24hiCD38hi B细胞具有免疫调节功能，可以抑制CD4+ T细胞分泌致病性细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-17，促进CD4+ T细胞分泌保护性细胞因子IL-4及表达Foxp3，其发挥免疫调节功能依赖IL-10的分泌。与健康对照组比较，T1DM患者外周血CD24hi CD38hi B细胞比例降低（5.6%±3.5% vs. 6.9%±3.3%，P<0.05）。Pearson相关分析提示T1DM患者外周血CD24hiCD38hi B细胞数量与分泌IFN-γ及TNF-α的CD4+ T细胞数量呈负相关（r分别为-0.248和-0.283，P分别为0.008和0.017），与CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞数量呈正相关（r=0.247，P=0.001），与HbA1c水平呈负相关（r= -0.273，P=0.002）。T1DM患者外周血CD24hiCD38hi B细胞免疫调节功能缺陷，可能与分泌IL-10显著减少有关。
结论：T1DM患者外周血CD24hi CD38hi B细胞存在数量水平及功能的缺陷，可能参与了T1DM的发病。
专家点评
张梅 南京医科大学第一附属医院
T1DM是一种由T淋巴细胞介导的慢性自身免疫性疾病。在遗传和环境因素的作用下，胰岛自身抗原暴露，被抗原提呈细胞提呈给CD4+ T细胞。致病性CD4+ T细胞被激活并克隆增殖，募集细胞毒性CD8+ T细胞和其他炎症细胞浸润胰岛β细胞，导致胰岛β细胞损伤。
然而，B淋巴细胞在T1DM发病中也发挥着重要作用。既往研究显示，B淋巴细胞一方面作为抗原提呈细胞参与T1DM的发病，另一方面还可分泌胰岛自身抗体。研究表明，90%的T1DM患者存在≥1种糖尿病相关胰岛自身抗体阳性，B淋巴细胞分泌的抗体可作为预测和诊断T1DM的重要生物学标志。
近年来研究发现了一群特殊类型的B淋巴细胞，即B10细胞，以分泌细胞因子IL-10为特征，具有负向免疫调节作用。B10细胞的发现使得B细胞在T1DM发病机制中的作用更加复杂和重要。目前，B10细胞已被证明在多种自身免疫性疾病中存在一定程度的数量及功能缺陷，可能参与了自身免疫性疾病的发病。那么，在T1DM中，B10细胞是否也存在数量及功能的异常？
我们的研究首先发现人外周血B10细胞的表型为CD24hi CD38hi，通过分泌细胞因子IL-10发挥负向免疫调节功能，一方面可以抑制CD4+ T细胞分泌致病性细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-17，另一方面促进CD4+ T细胞分泌保护性细胞因子IL-4及表达Foxp3。CD24hi CD38hi B细胞数量与分泌IFN-γ及TNF-α的CD4+ T细胞数量呈负相关，与CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞呈正相关，与HbA1c水平呈负相关。其次，研究进一步证实在T1DM患者外周血存在CD24hi CD38hi B细胞数量的减少和功能的缺陷，可能参与了T1DM的发病。
这一研究结果为深入地了解T1DM发病机制奠定了理论基础，为探索T1DM免疫治疗提供了新的思路。目前已有多种针对免疫细胞及细胞因子的免疫治疗方案，包括针对T淋巴细胞的CD3单克隆抗体治疗、针对B淋巴细胞的CD20单克隆抗体治疗等。未来免疫治疗的趋势将不仅仅是单一靶点的干预，而是多靶点的联合治疗；不仅针对免疫正向调控细胞，还应针对免疫负向调控细胞，以取得免疫调定点的平衡。CD24hi CD38hi B细胞作为免疫治疗的一个新靶点值得进一步研究。
专家介绍
张梅教授
医学博士，主任医师，教授；
南京医科大学第一附属医院内分泌学教研室副主任；
留学英国伦敦大学、加拿大Alberta大学及美国UCSF；
中华医学会内科学会青年委员；
中华医学会糖尿病学分1型糖尿病学组委员
江苏省医学会糖尿病学分会委员，糖尿病教育与血糖监测学组副组长；
南京医学会内分泌学分会副主任委员，全院血糖管理学组组长；
江苏省六大人才高峰重点培养对象，江苏省333重点培养人才；
主要研究方向为1型糖尿发病机制及细胞治疗
主持国家自然科学基金面上项目3项，省级课题4项等科研项目，发表论著40余篇，其中SCI论文18篇，为国家自然科学基金评审委员；
《中华内分泌及代谢病杂志》通讯编委，《中华糖尿病杂志》通讯编委
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