排排坐,来听课——信友荟微课堂之第一课:家禽血液采集、保存及送检方法
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随着我国养鸡业日益向规模化、集约化方向发展,鸡病也呈现出新的特点,如混合感染增多,病症复杂化和非典型化。为了给疾病的预防、控制、净化提供技术支持,必须执行日常疫病监测制度,在此过程中,鸡的血液采集是一项重要的常规性和前提性工作,准确快速的采血技术可以减少鸡只应激,避免造成鸡只不必要的死亡,还可使监测结果更为可靠。血样的采集看似简单,但真正操作起来,其难度和强度较大,集专业知识和操作技巧于一体。笔者结合长期的临床实践,主要针对与鸡采血技术相关的问题进行介绍。
一、采血前的准备工作主要器材:5ml一次性塑料注射器、试管、试管架,5%碘酊棉球、75%酒精棉球、干棉球、标签纸、记号笔、相关表格等。
人员要求:采血人员至少2人以上,需熟练掌握采血技巧,并遵循严格的无菌操作规程。兽医人员到鸡场采样时,要严格遵守鸡场消毒防疫等相关规定,口罩、乳胶手套、防护帽、防护服、防护鞋穿戴整齐后方可进入现场。
采血时间:采血场所尽量保证干净清洁,光线充足。夏季室温最好保持在25℃~28℃,冬季则在14℃~20℃。若鸡处于产蛋期间,最好等到下午大部分鸡产完蛋后采血,以免应激反应引起产蛋下降。
二、采血方法1、鸡冠采血法
该方法适用于需血量小的成年鸡采血。首先将鸡只保定,使用75%的消毒酒精棉反复擦拭鸡冠进行消毒,酒精挥发彻底后,用灭菌针头刺入鸡冠采集所需量的血液。吸取血液时要用手稍微用力挤压鸡冠,以便血液的溢出。采完血后要用浓碘酒涂抹伤口止血,既预防感染,又能制止因出血而引起的啄冠。
2、鸡心脏采血法心脏采血的对象有成年鸡和雏鸡。因两者在生理特点上相差较大,因此采血手法也不同。
成年鸡的心脏采血:使鸡右侧卧,并进行保定。助手在用左手固定鸡两腿的同时,右手固定翅膀根部,顺势用右手中指固定鸡头,在胸骨脊前端与背部凹陷两处的中间部位采血。将该部位用75%的酒精进行彻底的螺旋式消毒后,采血者保持针头与穿刺部位垂直,缓慢进针2~3cm后回抽,若发现回血即可缓慢抽取3~4ml心血。取血完毕后,用于碘伏棉球轻轻按压采血部位进行消毒。
对雏鸡进行心脏采血时较为简单。左手抓鸡,右手将采血针平行插入颈椎向胸腔前口方向缓慢推进,回抽发现回血即可向外牵拉采血针拉杆抽取足够量的血液。同样,在采血完毕后,注意采血部位的消毒。
3、鸡翼下静脉采血法该方法是鸡的采血方法中最常用的方法。首先将鸡只仰卧保定,暴露出鸡翅内侧。采血者先清理静脉血管周围的羽毛,用酒精棉球消毒翅静脉窝区,然后用针头稍稍挑起表皮,插入血管,轻轻拉动针筒,注意观察针筒内有无血液被吸出。当发现有血液开始被吸出时,必须保持注射器位置不动,让血液缓缓吸人注射器针筒内,达到所需的采血量后,助手用干棉球压迫血管上的伤口约30秒止血。
三、采血时的注意事项采血时做好现场记录,规范填写采血表格,包括鸡场名称、鸡的品种、日龄、样品数量、免疫情况等项目,每份样品做好标记,严防损失、混淆和污染。
采血量要根据检测要求采取。样品布点应符合代表性、准确性、合理性和科学性的原则,一般一个批次的鸡群至少采集15份样品。采集的样品应涉及不同的鸡舍,同一鸡舍的四个角落、中间位置都要采集血样,这样才具有说服力。
采血留下的废弃物,进行集中焚烧或深埋等无害化处理。
四、血液样品的保存与送检采集到血液后,应立即将针头拔掉,把注射器内的血液沿着试管壁徐徐注入,不能有气泡,也不能振荡。逐一编号,仔细核对,倾斜放置。
血液样品夏天在常温下,冬天在25℃~37℃温水中放置1h左Z右,即可析出血清,血清析出后需冷冻保存。
采集制作鸡红细胞悬液时,5mI注射器里应先放入2mL抗凝剂,抗凝剂用3.8g柠檬酸三钠溶于100mL蒸馏水中即可。
血液样品送检时,在保温箱中加适量的冰块防止血液变质,送检过程中尽量防止剧烈振荡。